淺述基因探針法PCR試劑盒的使用注意事項(xiàng)
點(diǎn)擊次數(shù)：657 更新時(shí)間：2022-05-13
基因探針法PCR試劑盒的特異性好，大大降低了檢測(cè)的假陽(yáng)性，靈敏度高，采用靈敏的熒光檢測(cè)系統(tǒng)對(duì)熒光信號(hào)進(jìn)行實(shí)時(shí)監(jiān)控，操作簡(jiǎn)單，無(wú)PCR產(chǎn)物污染，省去了麻煩的基因序列查詢、引物探針設(shè)計(jì)、PCR擴(kuò)增條件優(yōu)化等大量費(fèi)時(shí)、費(fèi)力、費(fèi)錢的繁瑣工作。
分子信標(biāo)是一種呈發(fā)夾結(jié)構(gòu)的莖環(huán)寡核苷酸探針，兩端的核酸序列互補(bǔ)配對(duì)，因此標(biāo)記在一端的熒光基團(tuán)與標(biāo)記在另一端的淬滅基團(tuán)緊緊靠近。熒光基團(tuán)被激發(fā)后產(chǎn)生的光子被淬滅劑淬滅，由熒光基團(tuán)產(chǎn)生的能量以紅外而不是可見光形式釋放出來(lái)。分子信標(biāo)的莖環(huán)結(jié)構(gòu)中，環(huán)一般為15-30個(gè)核苷酸長(zhǎng)，并與目標(biāo)序列互補(bǔ)；莖一般5-7個(gè)核苷酸長(zhǎng)，并相互配對(duì)形成莖的結(jié)構(gòu)。
下面小編要與大家分享的是基因探針法PCR試劑盒的使用注意事項(xiàng)：
1、本產(chǎn)品從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2、濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。
3、各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，使用排槍加樣。
4、請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線，做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高，請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)后再測(cè)定，計(jì)算時(shí)請(qǐng)后乘以總稀釋倍數(shù)。
5、封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
6、底物請(qǐng)避光保存。嚴(yán)格按照說(shuō)明書的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)。
7、為避免交叉污染，標(biāo)準(zhǔn)品、樣本和空白對(duì)照每加一個(gè)就要更換一次吸頭；酶標(biāo)工作液、樣本稀釋液和底物等公共組分，要懸臂加樣，不得碰到微孔；不得重復(fù)使用封板膜。
